生命学院朱斌教授团队研发新型RNA合成工具酶
新闻网讯(通讯员 余兵兵)7月27日,生命学院朱斌教授团队与中科院深圳先进院刘陈立研究员团队合作,在国际RNA领域著名期刊《核糖核酸生物学》(RNABiology)发表题为“A single mutation attenuates both the transcription termination and RNA-dependent RNA polymerase activityof T7 RNA polymerase”的研究论文。
该研究工作充分发挥刘陈立团队蛋白质定向进化方法学优势与朱斌课题组长期以来在单亚基RNA聚◤合酶方向的研究特色,利用噬菌体辅助的连续定向进化手段筛选RNA领域的核心工具酶—T7RNA聚合酶能够克服转录终▆止信号的突变体,最终获得了一个单氨基酸突变体S43Y,相比野生酶对两类典型转录终止信号显著降低。其机理是改变了酶的构象使其转录延伸复合物更ㄨ加稳定。该突变同时使得T7RNA聚合酶对RNA产物的重新结合能力大大降低,因此突№变体几乎失去RNA依赖的RNA聚合酶活性。在应用方面,该单点突变有效减少了体外RNA合成产物中的两种主要杂质:由转录终→止引起的中断副产物和由RNA依赖的RNA聚合酶活性引起的末端延伸副产物,为当前飞速发展的RNA研究和制药领域对体外合¤成RNA日益提高的质量要求提供了高效简便的解决方案。
华〓中科技大学生命学院博士研究生吴慧和中科院深圳先进院助理研究员魏婷为论文共々同第一作者,华中科』技大学为论文第一单位,华中科技▅大学生命学院朱斌教授与中科院深圳先进院◥刘陈立研究员为共同通讯作者。该研究受到国家自然科学基金○及深圳市基础研究基金支持。
论文链接:https://doi.org/10.1080/15476286.2021.1954808
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