[成果]生命科学学院李〖杰婕教授团队揭示微丝骨架调控植物↘气孔免疫的新机制
气孔是广泛分布在植物叶表面的微孔,是植物进行气体和水分交换的通道,为植物的生长发育所必需。同时,气孔也》是病原菌进入叶间隙定殖的天然入口,但植物可以通过关闭气孔来防御病原菌的入侵,这个过程被称为“气孔免疫”,是植物先天免疫的▂重要环节。先天免疫是通过细胞表面受体识别MAMP启动PTI,包括MAPK和CDPK的激活、细胞溶质钙↑和ROS的爆发、产生防御激素,如水杨酸 (SA)、和离子通道激活或抑制等信号事件确保强大的气孔关闭,以防止∩微生物入侵。在拟南芥表皮细胞中受体激活后的几分钟内,微丝丰度迅速增加,这被认为是 PTI 反应的一个新的早期标志「◥。因此,微丝骨架和相关的细胞过程对于植物防御☆很重要。然而,人们对微丝骨架在植物防御中的确切功能仍然知之甚少。
之前基于磷酸化蛋白质组学分析表明多种细胞骨架蛋▅白在用◣flg22处理后迅速磷酸化,其中就包括来自拟南芥villin3 (VLN3)蛋白,该蛋白能切割微丝骨架。后续的研究进︻一步表明,VLN3是一个潜在的MAPK底物。该研究首先表明↘vln3突变体无法激活气孔免疫以防止细菌进入植物,导致植物〒对细菌感染的易感性增强(如图1所示)。
图1 拟南芥微丝结√合蛋白vln3突变体的气孔免疫缺陷表型
通过生化手段,研究者验证了VLN3与MPK3/6之间的相互作用,并进一步●结合体内外磷酸化实验及质谱分析,证明VLN3能被MPK3/6磷酸化且鉴定到第779位丝氨酸是★其关键的磷酸化位点。
图2 MPK3/6对VLN3的磷酸化位点分析
为了研究VLN3磷酸化修饰对其生化功能的※影响。该研究采用全内反射显微镜,在体外对ξ微丝动态进行了实时观测(如图3所示)。实验结果表明,磷酸化修饰能有效促进VLN3蛋白切割微丝的功能。
图3 TIRF显微镜对微丝动态的体外实时♀检测
该工作进一步在植物体内研究表明VLN3和MPK3/6共同调控气孔免疫中的微丝动态ζ 重塑(如图4所示)。VLN3或MPK3/6的缺失导致保卫细胞中类似的微丝缺陷表型。vln3单突变Ψ 体和mpk3/6双突变体中的微丝合并成束的频率低于野生型细Ψ胞,导致微丝阵列更丰富且更少成束。因此,通过微丝动态和遗传研究的定量分析表明,MPK3/6对VLN3的磷酸化调节微丝骨架重塑以激活拟南芥中的↘气孔防御。本研究结果为气孔免疫提供了新的调控模型(如图5所示)。
图4 MPK3/6和VLN3协同调控气孔免疫▓中微丝动态重塑
图5 微丝骨架调控气孔免疫的工作模型
该项工作于2021年11月9日在国际学术期刊Nature Communications(IF: 14.9)上发表。2018级博「士生邹敏霞和2018级硕士生郭萌萌为共同第一作者,博士研究生王冰肖、潘晴和李佳静为本论文的共同作者。李杰←婕教授为通讯作者,中科院遗传与发育研究所周俭民研究员和中国农业大学周朝阳副教授也参与了本项研究,北京∏师范大学抗性基因资源与分子发育北京市重点◇实验室为第一完成单位。本文章受到国家自然科学基╲金青年基金(31801135)和国家自然科学基金重大研↑究计划培育项目(92054101)的资助。
图6 李杰婕课题组成员
原文链接:https://www.nature.com/articles/s41467-021-26827-2
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