清华新闻网1月9日电 1月7日，清华大学生命学院孙前文实验室在《细胞报道》（Cell Reports）期刊在线发表题为“RHON1共转录移ζ　除R-loop以维持拟南芥叶绿体基因组稳定性"(RHON1 co-transcriptionally resolves R-loops for Arabidopsis chloroplast genome maintenance)的研究论文。该研究揭示拟南芥中一种与细菌Rho因子』同源的DNA:RNA解旋酶RHON1与RNase H1分别通过不同的途径，来限制转录-复制正面对撞(HO-TRCs: Head-On direction Transcription-Replication Conflicts)导致的R-loop积累从而稳定叶绿体基因组的分子机制。

防止转录-复制正面︽对撞诱发的R-loop积累对细菌、植物以及哺乳动物基因组稳定性的维持至关重要。孙前文实验室前期已经鉴定了一「个RNase H1类的R-loop移除酶AtRNH1C可以与DNA Gyrase互作降解R-loop中的RNA，从而有效地松弛HO-TRCs以稳定叶绿体基因组（Yang et al., The Plant Cell, 2017）。但是，目前尚不清楚当RNase H蛋白缺乏时，生物体如何▆抵抗HO-TRCs诱发的R-loop积累。

为了更好的建立调控R-loop水平以维持基因组稳定性的调控网络，孙前文实验室以atrnh1c突变体为╲模型，巧妙的设计了两种筛选策略以寻找参与清除HO-TRCs诱发的R-loop积累从而稳定叶绿体基因组的因▓子。通过筛选，他们鉴定出了一条与AtRNH1C途径〓相平行的R-loop移除通路：DNA:RNA解旋酶RHON1介导的R-loop移除。RHON1的过表达可以挽救由于AtRNH1C基因突№变引起的HO-TRCs相关的R-loop积累（图1）。进一步研究发现RHON1可以与质体编码的RNA聚合酶（PEP）相互作用，通过协调PEP的转◆录活性，缓解基因组上转录复制对撞之间的冲突，同时限制和移除叶绿体基因组上形成的R-loop结构，进而维持基因组稳定（图2）。这一研究结果表※明，生物利用多种机制逃避HO-TRC诱发的R-loop积累，从而维持基因组完整︾性。 

图1：RHON1是一条与AtRNH1C途径〓相平行的R-loop移除通路。RHON1的过表达（OERHON1c）抑制atrnh1c突变体缺陷，同样AtRNH1C的过表达（OE1Crho）恢复rhon1突变体表型。 

图2：两种互卐补的R-loop介导叶绿体基因组稳定性维持的途径

清华大学生命学院博士研究生杨卓为本文第Ψ 一作者，清华大学生命学院孙前文研究员为本文的通◥讯作者，孙前文实验室的研究助理李孟孟在材料准备和验证等方面作出贡献。该工作得到国家自然科学基金委、科技部⊙国家重点研发计划以及生命科学联合中心等经费的支持。

论文链接：

https://www.cell.com/cell-reports/fulltext/S2211-1247(19)31646-8

相关参考文献：

http://www.cls.edu.cn/Research/Research_Achievements3897.shtml

http://www.plantcell.org/content/early/2017/09/21/tpc.17.00305?rss=1

供稿：生命学院

编辑：李华山

审核：周襄楠