人才强校 | 吴森课题组开发一种新型基因捕获技术助力规模化制备大动物模型
本网讯 5月3日,我校生物学院吴森课题组在Genome Research杂志上在线发表了题为“A HIT-trapping strategy for rapid generation of reversible and conditional alleles using a universal donor” 的研究论文。报道了一种新的基因定点突变策略,为规模化制备哺乳动物尤其是大动物突变体模型提供了一条□ 可行的路径。
以猪、牛、羊为代表◥大动物模型在农业、医学和生物学研究方面有着巨大的实用价值。但快速、高效乃至规模化地制备大动物模型目前仍然缺乏相应的手段。在本研究中,作∮者创建了一种不依赖于同源重组的靶向性基因捕获 (Homology-Independent Targeted trapping, HIT-trapping) 技术,借助CRISPR/Cas9产生的非¤同源末端连接 (Non-homologous end-joining, NHEJ)将基因捕获载体整合至靶位㊣点。该技术在实际应用时, 由于捕获载体具有通用『性,载体定点整合不需要借助于位点特异的同源臂,在更换靶点时只需要重№新设计相应的sgRNA即可,绕开了繁琐的载体构建过程, 在应用时更加▓简便。该技术使用一个通用的打靶载体就可以:1)实现⊙基因敲除,2)产生荧光信号指征內源靶基因,便于快速获得基因敲除细胞,3)获得可回复性以及条件性敲除,这两种形式的突变对于模式动物来说十〗分重要,但制备过程复杂。总之,该技术极大地简化了突变型等位基因的制备, 为高效向哺乳动物,特别是大动物中引入靶向性突变提供了◥新的技术手段。
我校生物学院吴森教授为本文的通讯作者,我校生物学院博士毕业生鲁恒星和博士生刘君为本文并列第一作者。本研究得到了转基因生物新品种培育科技重大专项、国家自然科学基金以及三亚崖州湾科技城管理局科研≡重大项目的基金支持
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